人類SNP捕獲

myBaits Expert Human Affinities Kit用于人類基因組SNPs富集，該試劑盒與古人類種群遺傳學(xué)領(lǐng)域的專家合作設(shè)計(jì)和開發(fā)，針對(duì)古代和現(xiàn)代人類種群中已知的2M以上多態(tài)位點(diǎn)設(shè)計(jì)，特異性捕獲人類基因組文庫(kù)中標(biāo)志性的有效信息，提高人類種群和進(jìn)化遺傳學(xué)研究方法的分辨率。與全基因組DNA測(cè)序相比，該試劑盒大大節(jié)省測(cè)序和分析成本，在高度降解或污染的樣本中尤為明顯。

產(chǎn)品特點(diǎn)

• 專家設(shè)計(jì) – 捕獲位點(diǎn)由人類基因組學(xué)行業(yè)專家鑒定

     · David Reich et al. (哈佛醫(yī)學(xué)院)

     · Pontus Skoglund (克里克研究院)

     · Yassine Souilmi et al. (澳大利亞古DNA研究中心)

• 靶向位點(diǎn)多 – 靶向人類種群 2M 以上多態(tài)位點(diǎn)，富含標(biāo)志性有效信息 

• 樣本類型廣 – 配方經(jīng)優(yōu)化，現(xiàn)代/化石/降解/法醫(yī)DNA樣本均適用

• 應(yīng)用靈活 – 兼容各種測(cè)序平臺(tái)和建庫(kù)方案，并可提供全流程服務(wù)

產(chǎn)品組成

myBaits Expert Human Affinities kit有三款panel供您選擇：

Prime 1240K模塊

該模塊發(fā)表于2015年(Mathieson et al., Nature)，經(jīng)典研究方法，已有超過(guò)99篇文獻(xiàn)引用

– 包含1.15M常染色體位點(diǎn)，49K X染色體位點(diǎn)，33K Y染色體位點(diǎn)

– 這些位點(diǎn)在眾多現(xiàn)代和古代類群中都呈現(xiàn)多態(tài)性

– 有大量公開的研究數(shù)據(jù)：

Allen Ancient DNA Resource (AADR): Downloadable genotypes of present-day and ancient 

DNA data | David Reich Lab (harvard.edu)

Ancestral 850K模塊

包含830K常染色體位點(diǎn)和20K X染色體位點(diǎn)

– 從Simons基因組多樣性項(xiàng)目 (SGDP)中篩選的全新位點(diǎn)

– 用幽靈血系（archaic humans）作為外類群，來(lái)確認(rèn)顛換突變（Transversions)

– 減少現(xiàn)有人類SNPs方案中確認(rèn)偏倚的影響，減少群體遺傳學(xué)推論的偏倚

– 減少其他數(shù)據(jù)集普遍存在的系統(tǒng)性過(guò)度分化非裔群體和非非裔群體的現(xiàn)象

Y Chromosome 46K模塊

– 從國(guó)際遺傳家譜學(xué)會(huì)(ISOGG)開發(fā)的數(shù)據(jù)庫(kù)中篩選的位點(diǎn)

– 包含全部目前已發(fā)現(xiàn)的Y染色體SNPs

– 提高群體內(nèi)部和群體之間父系關(guān)系的分辨率

Mito Trio模塊

– 探針覆蓋了三個(gè)不同的線粒體基因組:

　　·Revised Cambridge Reference Sequence(rCRS) 

　　·Reconstructed Sapiens Reference Sequence(RSRS) 

　　·Neanderthal(Vindija, Green et al. 2008, Cell)

– 比例恰當(dāng)，減少過(guò)度富集

產(chǎn)品列表

試劑盒的性能數(shù)據(jù)

參考基因組偏倚小

在各種地質(zhì)年代樣本中100K到1M的SNPs里，在雜合位點(diǎn)上幾乎不存在參考基因組偏倚。

數(shù)據(jù)顯示，在各種各地質(zhì)年代測(cè)試樣本的1000多個(gè)假定雜合位點(diǎn)上，沒(méi)有實(shí)質(zhì)性參考基因組偏倚。每個(gè)雜合位點(diǎn)至少有10x數(shù)據(jù)覆蓋率。SNPs分析參數(shù)見Günther & Nettelblad 2019(PLoS Genetics)。

穩(wěn)健的親緣關(guān)系信號(hào)

myBaits Expert Human Affinities Prime Plus在6組古代DNA樣本中穩(wěn)定捕獲的位點(diǎn)所揭示的種群結(jié)構(gòu)信息，與文獻(xiàn)報(bào)道的其他技術(shù)合成的1240K捕獲數(shù)據(jù)的結(jié)果高度相似。種群定義參見IGSR: The International Genome Sample Resource。

性能評(píng)估

為了評(píng)估試劑盒的性能，本實(shí)驗(yàn)富集了17個(gè)古人類樣本（dsDNA 或 ssDNA 建庫(kù)）和1個(gè)現(xiàn)代人類基因組 DNA 樣本文庫(kù)。每個(gè)文庫(kù)測(cè)序約 30M reads。測(cè)序數(shù)據(jù)比對(duì)到GRCh37/hg19參考基因組，覆蓋的SNPs位點(diǎn)按照Wang et al.2019(Nature Communications)的流程繪制表格。

在各組樣本中，穩(wěn)定捕獲百萬(wàn)以上有效SNPs

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，超過(guò)1.6M的目標(biāo)位點(diǎn)得到明顯富集。下表統(tǒng)計(jì)了在全部18個(gè)樣本(17個(gè)古代，1個(gè)現(xiàn)代)中均有富集的SNPs數(shù)量。

與各種古代DNA文庫(kù)的兼容性

下表數(shù)據(jù)顯示，4個(gè)不同年代、不同內(nèi)源性DNA含量的古代DNA樣本，用myBaits Expert Human Affinities Complete試劑盒富集測(cè)序后鑒別到的SNPs數(shù)量。

注：影響On-target效率的因素很多，除了樣本年代，樣本所處的環(huán)境，提取方法等等都會(huì)影響最終的效果，但是總的原則是樣本完整性越好效率越高。

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